TCR и BCR имеют ряд общих закономерностей регистрации и проведения в клетку активационных сигналов (см. рис. 5-8).
• Кластеризация рецепторов. Для активации лимфоцита необходима кластеризация антигенраспознающих рецепторов и корецепторов, т.е. «сшивка» нескольких рецепторов одним антигеном.
• Тирозинкиназы. В проведении сигнала значительную роль играют процессы фосфорилирования/дефосфорилирования белков по остатку тирозина под действием тирозинкиназ и тирозинфосфатаз, ведущие к активации или инактивации этих белков. Эти процессы легко обратимы и «удобны» для быстрых и гибких реакций клетки на внешние сигналы.
• Киназы Src. Богатые тирозином ITAM-последовательности цитоплазматических участков иммунорецепторов подвергаются фосфорилированию под действием нерецепторных (цитоплазматических) тирозинкиназ семейства Src (Fyn, Blk, Lyn в В-лимфоцитах, Lck и Fyn — в T-лимфоцитах).
◊ Активность киназ Src зависит от состояния C-концевого участка молекулы: его фосфорилирование под действием киназы Csk инактивирует, а дефосфорилирование трансмембранной тирозинфосфатазой CD45 — активирует фермент.
◊ Другой механизм регуляции активности киназ Src — их ковалентное связывание с убиквитином через адапторный
белок Cb1. Связывание с убиквитином «направляет» белки на деградацию в протеосомах.
• Другие киназы. Киназы ZAP-70 (в T-лимфоцитах) и Syk (в B-лимфоцитах), связываясь с фосфорилированными ITAM-последовательностями, активируются и начинают фосфорилировать адапторные белки: LAT (Linker for Activation of T cells) (киназой ZAP-70), SLP-76 (киназой Syk) и SLP-65 (киназой Syk).
• Фосфолипаза Cy (см. рис. 4-3). Киназы семейства Tec (Btk в B-лимфоцитах, Itk — в T-лимфоцитах) связывают адапторные белки и активируют фосфолипазу Cy (PLCy).
◊ PLCy расщепляет фосфатидилинозитдифосфат (PIP2) клеточной мембраны на фосфатидилинозиттрифосфат (PIP3) и диацилглицерин (DAG).
◊ DAG остаётся в мембране и активирует протеинкиназу С (PKC) — серин/треониновую киназу, которая активирует эволюционно «древний» фактор транскрипции NF-kB.
◊ PIP3 связывается со своим рецептором в эндоплазматическом ретикулуме и высвобождает ионы кальция из депо в цитозоль.
◊ Свободный кальций активирует кальцийсвязывающие белки — кальмодулин, регулирующий активность ряда других белков, и кальциневрин, дефосфорилирующий и тем самым активирующий ядерный фактор активированных T-лимфоцитов NFAT (Nuclear Factor of Activated T cells).
• Ras и другие малые G-белки в неактивном состоянии связаны с ГДФ, но адапторные белки заменяют последний на ГТФ, чем переводят Ras в активное состояние.
◊ Ras обладает собственной ГТФазной активностью и быстро отщепляет третий фосфат, чем возвращает себя в неактивное состояние (самоинактивируется).
◊ В состоянии кратковременной активации Ras успевает активировать очередной каскад киназ, называемых MAPK (Mitogen-Activated Protein Kinase), которые в итоге активируют фактор транскрипции AP-1 в ядре клетки.